Активность плазминогена: норма
Ключевым компонентом системы фибринолиза является плазминоген — гликопротеид с молекулярной массой 90,6 кДа, синтезируемый в гепатоцитах.
Ген, ответственный за синтез плазминогена, локализован на хромосоме 6 (q26). Молекулярные особенности позволяют этому проферменту связываться с лизиновыми остатками фибрина. Расщепление молекулы плазминогена в положении Arg561-Val562 тканевым активатором плазминогена или урокиназой ведет к образованию протеазы — плазмина. Основной физиологической задачей плазмина является протеолитическое разрушение кровяного сгустка, что, в свою очередь, способствует реканализации сосуда и репарации тканей, в которых был нарушен кровоток. В результате протеолиза фибрина в крови появляются продукты его разрушения с разной молекулярной массой, в т. ч. фрагменты D и Е. При врожденном дефиците плазминогена возникает склонность к тромбозам.
В настоящее время для количественного определения плазминогена наибольшее распространение получили методики, основанные на использовании различных пептидных хромо-генных субстратов, специфичных к плазмину. В качестве примера в данном разделе монографии представлен один из таких методов, разработка и клиническая апробация которого были одной из задач диссертационного исследования автора настоящей монографии. Хромогенный пептидный субстрат плазмина, используемый в этом методе, был разработан группой.
Реактивы и оборудование
- Раствор хромогенного субстрата For-Ala-Phe-Lys-pNA.HBr.
- Раствор стрептокиназы 125 000 МЕ/мл.
- Буферный раствор трис-HCl (0,05 М), рН 7,4.
- 20% раствор уксусной кислоты.
- Образец БТП с известным содержанием плазминогена.
- Фотометр.
Образцы крови для исследования
Для выполнения метода требуется цитратная БТП.
У здоровых людей содержание плазминогена в плазме находится в диапазоне 75-135 %.
Интерпретация результатов исследования Врожденный дефицит плазминогена — редкое тромбофилическое состояние. Причем это нарушение диагностируется далеко не всегда, поскольку склонность к возникновению тромбозов значительно менее выраженная, чем при других тромбофилических аномалиях системы гемостаза. Рецидивы тромбозов развиваются, как правило, при активности плазминогена менее 40-50 %.
Приобретенный дефицит плазминогена может быть обусловлен недостаточным его синтезом при болезнях печени, повышенным расходом вследствие внутрисосудистого свертывания и при лечении фибринолитиками.
Причины ошибок
- Ошибки преаналитического этапа исследования.
- Наличие в исследуемой крови гепарина.
- Гемолиз.
Другие аналитические технологии
В настоящее время на рынке представлены наборы реагентов для определения концентрации плазминогена на основе ИФА. Такие иммунологические методы отличаются высокой точностью и воспроизводимостью, однако при молекулярных аномалиях плазминогена наблюдается несовпадение результатов этих методов с амидолитическими способами.