Антитела к кардиолипину: норма

Этот отрицательно заряженный фосфолипид впервые был выделен из тканей сердечной мышцы, что и определило его название.

Обнаружение высокого титра антител к кардиолипину используют для диагностики АФС. Однако выявление антител к кардиолипину, несмотря на высокую надежность и воспроизводимость, в клинической практике должно дополняться и другими методами иммунологической диагностики АФС, а также определением ВА, поскольку антитела к кардиолипину в ряде ситуаций обнаруживаются при малярии, сифилисе, туберкулезе и др.

Принцип метода

Методики количественного определения антител к кардиолипину основаны на технологиях ELISA. На первом этапе разведенные образцы пациентов инкубируют в лунках планшета. Используемые в наборе лунки планшета покрыты высокоочи-щенным кардиолипином. При наличии специфических иммуноглобулинов в исследуемом образце последние связываются с антигенами на твердой фазе. После добавления хромогена смесь приобретает окраску за счет его расщепления пероксидазой.

Реактивы и оборудование

• Лунки микропланшета, покрытые высокоочищенным кардиолипином.
• Ферментный конъюгат.
• Буфер для разведения образцов.
• Промывочный буфер.
• Раствор тетраметилбензидина.
• Стоп-реагент.
• Калибраторы.
• Оборудование для выполнения ELISA (вошер, ридер для планшетов и др.).

Дистрибьютор диагностического набора реагентов — ЗАО «Биохиммак».

Образцы крови для исследования

В качестве образца для определения концентрации антител к кардиолипину следует использовать БТП из стабилизированной натрия цитратом крови или сыворотку.

Техника выполнения

Процедура исследования должна четко соответствовать инструкции к набору реагентов.

Оценка результатов исследования

Поскольку в настоящее время не существует международного стандарта антител к кардиолипину, результаты исследования оценивают в относительных единицах (Ед/мл).

Для осуществления контроля качества определяют концентрацию антител к кардиолипину в положительном и отрицательном контролях.

Причины ошибок

• Несоблюдение температурного режима хранения.
• Нарушение процедуры промывки (при ручной промывке нужно промывать не менее 4 раз). После осуществления промывки следует осушить планшет на фильтровальной бумаге, поскольку жидкость, обычно остающаяся в лунках после промывки, может помешать действию субстрата и снизить оптическую плотность исследуемого образца.
• Смешивание реагентов из различных лотов.
• конденсация влаги внутри лунок. Для предупреждения возникновения конденсата не следует вскрывать пакет до тех пор, пока он не прогреется до комнатной температуры.

Другие аналитические технологии Поскольку обнаружение антикардиолипиновых антител основано на учете взаимодействия антигена и антитела, для их выявления пригодны и другие технологии, позволяющие метить компоненты иммунного взаимодействия (фермент, радионуклид, флюоресцентный краситель и др.).