Лабораторные исследования в медицине: виды, методы
При заборе из центрального венозного катетера или артериального доступа получить, по меньшей мере, 2 мл крови, чтобы избежать разведения.
Пробу капиллярной крови берут при определении уровня глюкозы, билирубина, газового состава крови, на мазок; возможные причины ошибок при заборе капиллярной крови: содержание гемоглобина на 1 — 2 г/дл выше, чем в венозной крови; анализ газового состава крови: показатели содержания кислорода недостоверны.
Забор артериальной крови на анализ газового состава подходит для определения содержания кислорода в крови.
Гематологические исследования
Определение уровня гемоглобина, гематокрита, ретикулоцитов, тромбоцитов, лейкоцитов, дифференцированный мазок крови.
Пробирки, как правило, с красной пробкой.
Для торможения свертывания крови в пробирки добавляют этилендиаминтетрауксусную кислоту.
Добавку этилендиаминтетрауксусной кислоты основательно растворить, но не встряхивать, поскольку это приводит к разрушению тромбоцитов и эритроцитов.
При заборе крови пробу для этих анализов всегда брать первой, иначе возможны ошибки из-за агрегации тромбоцитов. Внимание: избегать загрязнения других пробирок искажение результатов (из-за свертывания, К, Са).
После длительного стояния число эритроцитов, гематокрит и содержание гемоглобина повышается на 10% (гемоконцентрация вследствие перераспределения жидкости в тканях).
Исследования гемостаза (коагулограмма)
Специальные пробирки.
Для торможения свертывания крови добавляют цитрат натрия.
Придерживаться точного объема пробы; после наполнения пробирки тщательно перемешать, но не встряхивать.
Затем следует мазок крови, так как свертывание происходит уже в канюле или шприце.
Определение активированного частичного тромбопластинового времени, тромбинового времени, фибриногена, антитромбина III; расширенная коагулограмма при специальных исследованиях.
Цитрат натрия также добавляют для определения скорости оседания эритроцитов (СОЭ) (цитрат натрия/общий объем=1/5).
Клиническая биохимия
Сыворотка крови
Противосвертывающие вещества не добавляют; используют, например, пробирки типа «Эппендорф» или пробирки для сыворотки с белой пробкой.
Центрифугирование: отделившееся=сыворотка крови.
Подходит для большинства биохимических анализов: например определения содержания электролитов, глюкозы, креатинина, мочевины, белка, активности сывороточных ферментов, уровня С-реактивного белка (СРБ), холестерина, триглицеридов, электрофореза, серологических исследований.
Плазма крови
Для торможения свертывания добавляют гепарин; обычно используют пробирки с оранжевой пробкой, спектр исследований сходен с таковым сыворотки крови.
Торможение свертывания и гликолиза при помощи хлорида натрия; для определения лактата и пирувата обычно используют иробирки с желтой пробкой.
Центрифугирование: отделившееся=плазма.
Моча
Общий анализ: немедленная транспортировка для определения числа клеток (лейкоциты, эритроциты); по возможности, средняя порция мочи. Грудные и маленькие дети: пункция мочевого пузыря, катетеризация.
При подозрении на инфекции мочевыводящих путей.
Суточная моча: перед началом исследования опорожнить моченой пузырь, после чего собирать все порции в течение 24 ч; на исследование направляют всю мочу или ее порцию после перемешивания; записать общий объем мочи.
Спинномозговая жидкость
Определяют число клеток, содержание белка, глюкозы.
Используют, например, пробирки типа «Эппендорф».
Для определения числа клеток транспортируют немедленно.
Стул: пробирки для стула, например, для определения химотрипсина и эластазы.
Микробиологические исследования
Общие мероприятия
Материал немедленно транспортируют в лабораторию; в противном случае исходно стерильный материал инкубируют при температуре 37 °С; исходно нестерильный материал хранят при комнатной температуре. Мочу и сыворотку не инкубируют, в исключительных случаях хранят при 4 °С.
Пробу берут, по возможности, до начала лечения антибиотиками.
Посев крови (гемокультура)
Использовать стерильные перчатки и маску для взятия крови. Тщательно продезинфицировать кожу перед забором крови. При подозрении на сепсис, вызванный катетером, пробу крови забирают из центрального венозного катетера.
Подогреть сосуды для посева крови.
Набрать кровь из конуса канюли или непосредственно в стерильный шприц.
Поменяв иглу, ввести кровь в сосуд для посева, оптимальное соотношение кровь/питательная среда=1/10.
При посеве анаэробных микроорганизмов использовать специальные сосуды для гемокультуры.
При лечении антибиотиками использовать сосуды для посева с абсорбирующими смолами.
Посев спинномозговой жидкости
Люмбальную пункцию проводят в асептических условиях. Капли ликвора собирают в стерильную пробирку. При длительной транспортировке ликвор помещают в сосуды для посева крови.
Плевральная, перикардиальная и синовиальная жидкость
Пункция в асептических условиях.
При быстрой транспортировке пробу жидкости оставить в шприце. При длительной транспортировке использовать сосуды для посева крови.
Мазки
Отправлять в среде для транспортировки.
При проведении анализа на анаэробные микроорганизмы применяют специальные среды для транспортировки.
Для мазка с конъюнктивы лучше всего подходит тампон, смоченный раствором хлорида натрия.
Моча
Забор мочи.
Исследование мочи проводят в течение 2—3 ч с момента забора пробы; в противном случае пробу охлаждают (4°С), охлажденную пробу можно хранить до 24 ч.
Альтернативой служит использование питательной среды для погружной культуры.
Для выделения цитомегаловируса необходимо отправить на исследование несколько проб.
Смыв с трахеи
Пробу набирают в стерильные пробирки. Густой секрет смывают 0,9% раствором натрия хлорида. Исследование проводят в течение 2—3 ч с момента забора пробы; в противном случае пробу охлаждают (4 °С), охлажденную пробу можно хранить до 24 ч.
Стул
Пробу стула размером с фасолину помещают в стерильную пробирку.
Оптимальным считают исследование еще теплого стула.
Биопсия и гистологические исследования
Общие правила
При фиксации материала и его транспортировке руководствуются видом ткани и задачей исследования.
При возникновении сомнений перед фиксацией материала и его транспортировкой следует консультироваться с патологоанатомами.
Биопсии
Взятие ткани: взятие крупных кусочков ткани во время операции или пункций (например, печень, почки, кости).
Для большинства гистологических исследований кусочек ткани помещают в 4% раствор формальдегида (например, нервная ткань, мускулатура, костная ткань, хрящ, печень, селезенка, лимфатический узел, слизистая оболочка пищеварительного тракта).
Для срочного гистологического исследования пробу немедленно транспортируют в тампоне, смоченном 0,9% раствором натрия хлорида; фиксации не требуется.
Для электронно-микроскопических исследований ткань фиксируют в глутаровом альдегиде.
Поскольку способы фиксации ткани для иммуногистологических исследований различны, в этих случаях следует предварительно проконсультироваться с патологоанатомами.
Цитологическое исследование
Эксфолиативная цитология: клетки слущивают с поверхности органа (например, бронхов).
Пункционная цитология: пункция ткани тонкой иглой.
Как правило, пробу фиксируют в 0,5% растворе полиэтиленгликоля в 80% изопропаноле.